期刊简介
本刊为综合性医学期刊，反映学院科研、教学、医疗的新成果和新经验，促进院内外学术交流和科研、教学、医疗水平的提高，同时为教学实习基地的医疗卫生工作者提供学术交流的平台。
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首页>皖南医学院学报杂志
- 杂志名称：皖南医学院学报杂志
- 主管单位：安徽省教育厅
- 主办单位：皖南医学院
- 国际刊号：1002-0217
- 国内刊号：34-1068/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：安徽省高校优秀学报二等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 万方收录(中)
人HCN4基因真核表达质粒构建及在HEK293细胞中的表达
谢向荣；左广锋；程浪；汪茗；曹蘅；汪和贵；蔚有权；杨浩；芮世宝；杨玉雯；汤圣兴
关键词：HCN4基因, 转染, 异源性表达, HEK293细胞
摘要：目的：构建人HCN4基因的真核表达质粒并转染人胚胎肾细胞，建立异源性表达HCN4通道模型。方法：通过聚合酶链反应扩增人HCN4基因全长核苷酸序列，双酶切（ XhoI和EcoRI）后插入真核表达质粒pIRES2-EGFP中，构建重组真核表达质粒pIRES2-HCN4-EGFP。应用脂质体法将重组质粒pIRES2-HCN4-EGFP转染入HEK293细胞中进行表达。全细胞膜片钳技术检测HCN4通道电流。结果：酶切及测序的结果显示pIRES2-HCN4-EGFP构建成功，倒置荧光显微镜能观察到EGFP绿色荧光，反转录-聚合酶链反应检测到HCN4 mRNA表达，膜片钳检测到HCN4基因编码的通道电流。结论：成功建立异源性表达HCN4通道模型，为进一步研究HCN4通道电生理特性提供了实验基础。
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